根據(jù)個人的試驗經歷，我們都或多或少把握了一些小技巧。zui終的試驗成果是受整個操作進程及試劑本身影響的，所系還要多學習，多參看，讓試驗成果更加。ELISA檢測體系是免疫學反應應用到生產中zui為活絡的技術手段，有著十分重要的效果。下面是上海酶聯(lián)生物專家對的經歷講談：
一、試驗包被液的選擇
一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時因為試驗的需要，包被原的特殊性也或許選用中性的緩沖溶液來包。應留意以下原理：因為蛋白質與聚苯乙烯固相載體是經過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果，這種物理吸附對錯特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質一般含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有鞏固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
二、包被原的性質很重要
蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其辨認，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格正告我必定要在冰浴下緩慢消融便是這個道理。還有有的包被原或許不是蛋白，關于生物素和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被。
1.親和素生物素：先親和素先包被載體，參與生物素化的DNA，這種包被辦法均勻、健壯，已擴展應用于各種抗原物質的定量測定。
2.脂類物質：可將其在有機溶劑中溶解后參與Elisa板孔中，開蓋置冰箱或涼風吹干，待酒精蒸騰后，讓脂質天然干固在固相表面。
3.小分子必須依托和大的蛋白載體偶聯(lián)后才華固定在固相載體上。
三、封閉
繼包被之后用高濃度的無關蛋白質溶液再包被的進程。封閉便是讓大量不相關的蛋白質充填這些空地，然后排擠Elisa后的過程中攪擾物質的再吸附。常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉，比較價廉，可以高濃度使用(5%-10%)；還有一些稀有用到的各種動物血清(首要為了掃除類似蛋白攪擾)和酪蛋白等等。但zui終選用什么，要依據(jù)試驗具體來實踐。
zui后上海恒遠特別提示，每次做盡量要把陰陽空三個對照做好，如出現(xiàn)問題也好剖析。購買我公司ELISA試劑盒，有任何疑問都可業(yè)務員，我們將供給全程！
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